近日,北京佑安医院,北京市肝病研究所生物芯片科研团队在甲胎蛋白异质体检测方面再创佳绩,获得澳大利亚发明专利。该发明专利为生物芯片科研团队就该检测领域获得的第三项国际专利,是基于前两项国际专利技术,反复试验终于在血清标志物检测领域取得了突破性进步。
该发明专利的优势为:操作简单,耗时短,费用低,患者血量采集少。该专利基于蛋白芯片技术,采用硝酸纤维素膜替代蛋白芯片的醛基玻片,改进操作流程,形成免疫渗滤方法,检测血清中的甲胎蛋白异质体(AFP-L3),能够在5分钟内完成检测结果报告,仅需要患者血清10微升,检测费用在20元人民币左右,并且不需要专门的仪器设备进行检测结果分析,肉眼观察即可判断结果。
目前,甲胎蛋白(AFP)是目前应用最广泛的肝癌标志物检测,依据AFP与小扁豆凝集素(LCA)的亲和力可分为3种异质体,其中甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)主要由肿瘤细胞产生,被认为是一种高特异性的新型肿瘤标志物,尤其在疾病进展快、分化程度低以及预后不好的肝癌患者中AFP-L3占AFP的比例(AFP-L3%)明显升高,因此被广泛地应用于肝癌患者的早期诊断及预后评估。目前临床上的检测技术是从血清总甲胎蛋白(AFP)中首先分离出甲胎蛋白异质体(AFP-L3),然后电化学发光方法对分离的甲胎蛋白异质体(AFP-L3)进行定量检测。程序繁琐,时间长,大概需要4个小时,费用高,需要患者的血清量400微升。
北京市肝病研究所生物芯片科研团队组建于2012年,近年来在李宁院长的带领下,全面贯彻 “全心全意为病人服务”的科研宗旨,积极开展与中国军事医学科学院王升启将军及北京大学柯杨校长等专家的合作,通过张爱英博士及团队成员的科研攻关,共同完成了生物芯片的研发创新工作。该科研团队近年来硕果累累,已经获得了三项国际专利,一项国家专利。另外有3项国内专利和3项国际专利正在审批中;累计发表SCI文章7篇,核心文章12篇,其中“应用蛋白芯片进行肝癌标志物的血清学检测”创新成果发表在《Nature》 旗下的子刊《Scientificreports》刊登 ,该团队关于肝癌早期肿瘤标志物检测的工作得到了业内的一致好评和广泛认可。
图1.制备免疫渗滤硝酸纤维素膜的示意图,阳性对照区固定AFP,中间检测区固定小扁豆素,阴性对照区固定BSA。
图2是本发明的免疫渗滤方法的结果示意图,其中,1-3是阳性结果;4-5是阴性结果。