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【佑安学术】独具特色,北京佑安医院任锋团队多项CRISPR研究结果在国内学术会议汇报和交流

作者:肝病研究所 张向颖 浏览次数:
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成簇规律间隔短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR相关系统(Cas)作为一种新型的核酸检测技术,因其具有高灵敏度和高特异性的独特特性,在过去的十年中受到了广泛关注并取得了很大进展。任锋教授科研团队近年来利用CRISPR新技术致力于传染病相关病原体核酸检测新方法的建立与临床应用,研究成果相继在国内学术会议中进行汇报和交流。

任锋教授2021级博士研究生田原,在2023年4月成都举办的“第三届中华分子诊断大会”优秀论文评选中荣获“三等奖”,论文的题目是“基于PCR-CRISPR/Cas13a技术检测乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA方法的建立和临床验证”。研究通过选定HBV cccDNA跨缺口区作为扩增靶序列,设计特异性PCR引物、荧光定量PCR探针以及crRNA,建立了基于CRISPR-Cas13a技术的HBV cccDNA检测新方法。本研究使用qPCR、PCR-CRISPR、RCA-qPCR、RCA-PCR-CRISPR和ddPCR五种方法对40例HBV相关病人的肝组织和24例HBV相关病人的血浆、全血和PBMC进行了检测。结果表明,RCA-PCR-CRISPR方法对肝组织的检出率为72.5%,高于其他检测方法。本研究建立了基于CRISPR/Cas13a的新型检测方法,可对HBV cccDNA进行高灵敏度和特异性检测,为准确检测HBV感染、抗病毒治疗评估、治疗终点的确定以及调整治疗方案提供了有力的技术支撑。


任锋教授2022级博士研究生范子豪,在2023年3月重庆举办的“第四届全国临床检验诊断学和医学检验技术研究生学术论坛”优秀论文评选中荣获“二等奖”,论文的题目是“CRISPR/Cas13a技术助力乙型肝炎低病毒血症患者HBV DNA快速便捷检测”。该研究利用CRISPR/Cas13a检测新技术,联合等温扩增技术(RAA),建立了基于RAA-CRISPR/ Cas13a的HBV DNA快速、便携检测试纸条。这种快速便携的HBV DNA检测试纸条将有望迅速扩大HBV感染的诊断筛查能力和覆盖面积,为HBV感染者特别是HBV低病毒血症患者(LLV)的HBV DNA检测提供了一种可视化的、快速检测的替代方案。这将简化HBV感染患者抗病毒治疗效果的验证过程,有助于解决HBV感染这一全球公共卫生问题。


任锋教授2020级硕士研究生曹亚玲,于2023年6月在青岛参加了由中华医学会、中华医学会肝病学分会主办的“第六次全国肝病相关感染学术会议”,并在大会中汇报“基于CRISPR/Cas13a技术的耐碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌快速检测新方法的建立及评价”相关研究。该研究利用CRISPR/Cas13a检测新技术,联合聚合酶链式反应(PCR)、等温扩增技术(RAA),建立了基于PCR/RAA-CRISPR/ Cas13a检测耐碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌(CRKP)的方法。通过结合横向侧流试纸条技术实现结果的可视化。该方法使用PCR/RAA-CRISPR检测51株临床样本,CRKP检出率可达到92.16%,这有助于在小型实验室开展CRKP的检测工作,在耐药监测、感染控制以及临床治疗指导方面有广泛的应用前景。

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CRISPR新技术被《Nature》认为是2022年7大“颠覆性”技术之一。基于CRISPR技术可实现快速、精确、便携式的核酸诊断,其有望成为下一代核酸检测新技术,尤其是在感染性疾病的诊断上有着极佳的发展前景。随着国内外CRISPR/Cas相关分子诊断技术不断发展和优化,其应用场景将被不断拓展,有望成为新一代通用型、平台型的分子诊断技术。